Ανοσοηλεκτροφόρηση

ο Ανοσοηλεκτροφόρηση χρησιμοποιείται για εργαστηριακή διαγνωστική ανίχνευση μονοκλωνικών αντισωμάτων στο αίμα ενός ασθενούς. Τα μονοκλωνικά αντισώματα προέρχονται από το ίδιο κύτταρο και κατευθύνονται έναντι των ίδιων αντιγόνων. Για το λόγο αυτό, πρέπει να αξιολογηθούν ως παθολογικά και, εάν αποδειχθούν, μιλούν για ασθένειες όπως η νόσος του Waldenström.

Τι είναι η ανοσοηλεκτροφόρηση;

Τα ιόντα έχουν διαφορετική κινητικότητα. Αυτή η διαφορετική κινητικότητα αποτελεί τη βάση της διαδικασίας ηλεκτροφόρησης. Αυτές οι μέθοδοι διαχωρίζουν διαφορετικές ουσίες μεταξύ τους χρησιμοποιώντας ηλεκτρικά πεδία και βαρύτητα. Μια πολύ γνωστή μέθοδος στον τομέα είναι η ανοσοηλεκτροφαίρεση.

Αυτή είναι μια ποιοτική διαγνωστική μέθοδος που χρησιμοποιείται για την ανίχνευση μονοκλωνικών αντισωμάτων. Τα αντισώματα είναι ανοσολογικά ενεργές πρωτεϊνικές ουσίες από μια συγκεκριμένη κυτταρική σειρά. Τα μονοκλωνικά αντισώματα βασίζονται όλα στα ίδια Β λεμφοκύτταρα και επομένως στρέφονται εναντίον ενός μόνο επιτόπου. Κάθε φυσική ανοσοαπόκριση στα αντιγόνα εισβολής αντιστοιχεί σε μια πολυκλωνική απόκριση και επομένως στρέφεται εναντίον διαφορετικών επιτόπων. Επομένως, η μονοκλωνική ανοσοαπόκριση παρέχει ενδείξεις παθολογικών σωματικών διαδικασιών.

Τα μονοκλωνικά αντισώματα δεσμεύουν διαφορετικά μόρια με υψηλή ειδικότητα. Αυτή η σύνδεση μπορεί να αποδειχθεί μέσω ανοσοηλεκτροφόρησης. Η διαδικασία είναι μια ποιοτική διαδικασία στην εργαστηριακή διάγνωση και αποτελείται από τους δύο τύπους διαδικασίας, την ηλεκτροφόρηση στον ορό και την ανοσοδιάχυση.

Λειτουργία, αποτέλεσμα και στόχοι

Η ανοσοηλεκτροφόρηση συνδυάζει τη μεθοδολογία της ηλεκτροφόρησης του ορού με την ανοσοδιάχυση. Ο ορός του ασθενούς τοποθετείται σε γέλη αγαρόζης ή φιλμ οξικής κυτταρίνης. Εφαρμόζεται επίσης ορός ελέγχου. Η εφαρμογή ακολουθείται από ηλεκτροφορητικό διαχωρισμό των δειγμάτων. Αντιοροί, IgG, IgA, IgM, οξικό οξύ για φυσιολογική ηλεκτροφόρηση και κάπα και λάμδα εφαρμόζονται μεταξύ των διαχωριστικών γραμμών.

Αυτό δημιουργεί μια αντίδραση με τα αντισώματα στον ορό του ασθενούς, που δημιουργεί γραμμές καθίζησης. Ανάλογα με τον αντιορό που χρησιμοποιείται και τη θέση και το σχήμα των επιμέρους γραμμών, μπορούν να εξαχθούν συμπεράσματα σχετικά με τις ανοσοσφαιρίνες που περιέχονται με ελαφρές αλυσίδες κάπα ή λάμδα. Στην περίπτωση λωρίδας λάμδα, υπάρχουν ελεύθερες ελαφριές αλυσίδες που αποτελούνται από αντισώματα. Το εργαστήριο παρέχει πρόσθετες ενδείξεις μέσω των σπάνιων IgE και IgD, που επιτρέπει τον ακριβή προσδιορισμό των ανοσοσφαιρινών. Μια μέθοδος ηλεκτροφόρησης ανοσοδιάχυσης λαμβάνει χώρα σύμφωνα με τους Pierre Grabar και Curtis Williams και αντιστοιχεί σε ένα συνδυασμό ηλεκτροφόρησης γέλης αγαρόζης πρωτεϊνών και διάχυσης αντισωμάτων.

Πρώτα λαμβάνει χώρα η ηλεκτροφόρηση γέλης αγαρόζης. Στη συνέχεια, τα περιεχόμενα αντισώματα διαχέονται έναντι των ζωνών αντιγόνων και έτσι δημιουργούν τόξα ιζήματος. Θα πρέπει να γίνει διάκριση μεταξύ αυτής και της ανοσοηλεκτροφόρησης του πυραύλου Laurell, η οποία αντιστοιχεί στην ηλεκτροφόρηση των πρωτεϊνών μέσα σε ένα πήκτωμα αγαρόζης, καθεμία από τις οποίες έχει αντισώματα σε μια συγκεκριμένη συγκέντρωση. Η γέλη περιέχει ένα ελαφρώς βασικό ρυθμιστικό που επιτρέπει μόνο στα αντιγόνα να μεταναστεύσουν και, μέσω της έκθεσης στο ελαφρώς βασικό ρΗ, ωθεί τα περισσότερα αντισώματα στο ισοηλεκτρικό σημείο έως ότου σταματήσουν να κινούνται ηλεκτροφορητικά.

Στην αρχή της ανοσοηλεκτροφόρησης πυραύλων υπάρχει περίσσεια αντιγόνου, έτσι ώστε να σχηματίζονται διαλυτά σύμπλοκα αντιγόνου-αντισώματος. Κατά τη διάρκεια της ηλεκτροφόρησης, υπάρχει επίσης σύνδεση μεταξύ αντιγόνων και άλλων αντισωμάτων. Με αυτόν τον τρόπο, ανοσοκαταβύθιση σχηματίζονται στο σημείο ισοδυναμίας, που μοιάζουν με σχήματα πυραύλων με ύψος ανάλογο με τη συγκέντρωση αντιγόνου. Το ύψος του ιζήματος μετράται για να αξιολογηθεί η δοκιμή.

Μπορείτε να βρείτε το φάρμακό σας εδώ

Κίνδυνοι, παρενέργειες & κίνδυνοι

Η ανίχνευση μονοκλωνικών αντισωμάτων έχει ιδιαίτερη σημασία για τη διάγνωση του πολλαπλού μυελώματος και της νόσου του Waldenström. Τα στοιχεία που παρέχονται μιλούν για έναν κακοήθη εκφυλισμό των ανοσοκυττάρων. Το πολλαπλό μυέλωμα αντιστοιχεί σε έναν καρκίνο στον μυελό των οστών, ο οποίος χαρακτηρίζεται από τον κακοήθη πολλαπλασιασμό των κυττάρων που παράγουν αντισώματα στο πλάσμα.

Αυτά τα κύτταρα πλάσματος παράγουν αντισώματα και τα θραύσματά τους. Τα κακοήθη κύτταρα πλάσματος προέρχονται πάντα από ένα κοινό πρόδρομο κύτταρο και επομένως είναι γενετικά ταυτόσημα. Παράγουν μόνο μονοκλωνικά αντισώματα. Η κακοήθεια αυτής της νόσου μπορεί να αντιστοιχεί σε ένα προκαρκινικό στάδιο, αλλά μπορεί επίσης να φτάσει σε ένα πολύ κακοήθη στάδιο, το οποίο χωρίς θεραπεία είναι γρήγορα θανατηφόρο. Τα συμπτώματα της νόσου προκύπτουν από την κακοήθη ανάπτυξη των κυττάρων ή από τα αντισώματα και τα θραύσματα αντισωμάτων. Τα πιο κοινά συμπτώματα περιλαμβάνουν πόνο στα οστά, διάλυση των οστών και αυθόρμητα κατάγματα.

Το επίπεδο ασβεστίου στο αίμα αυξάνεται συχνά. Επιπλέον, τα μη φυσιολογικά αντισώματα εναποτίθενται συχνά στον ιστό και προκαλούν λειτουργικές διαταραχές στα όργανα, τα οποία μπορεί να οδηγήσουν σε συμπτώματα όπως νεφρική ανεπάρκεια ή μειωμένη ροή αίματος. Η νόσος του Waldström είναι επίσης μια κακοήθης νόσος του όγκου. Πιο συγκεκριμένα, είναι μια κακοήθης νόσος λεμφώματος που συγκαταλέγεται μεταξύ των αργά εξελισσόμενων και σχεδόν ασυμπτωματικών λεμφωμάτων μη-Hodgkin Β-κυττάρων. Στις περισσότερες περιπτώσεις, η μη φυσιολογική παραγωγή μονοκλωνικού IgM λόγω της δραστηριότητας των κακοήθων κυττάρων λεμφώματος μπορεί να ανιχνευθεί στην ασθένεια.

Η νόσος του Waldenström είναι εξαιρετικά παρόμοια με το πολλαπλό μυέλωμα στις ιδιότητές της, αλλά συνήθως δείχνει μια πιο ευνοϊκή πορεία. Οι περισσότεροι ασθενείς με νόσο του Waldenström είναι σε μεγάλο βαθμό ασυμπτωματικοί κατά τη στιγμή της διάγνωσής τους. Άλλοι ασθενείς εμφανίζουν συμπτώματα νωρίς, όπως μη ειδική κόπωση ή περιφερικές νευροπάθειες, τα οποία προκαλούνται από την εναπόθεση μονοκλωνικών IgM εντός της θήκης μυελίνης. Ακόμη και μικρές ποσότητες IgM μπορούν να προκαλέσουν πολυνευροπάθεια. Δεν εμφανίζεται πολυνευροπάθεια σε άλλους ασθενείς, ακόμη και σε υψηλά επίπεδα. Επιπλέον, μπορεί να εμφανιστούν μη ειδικά συμπτώματα όπως πυρετός, ανεπιθύμητη απώλεια βάρους ή νυχτερινές εφιδρώσεις. Ο πόνος στα οστά είναι επίσης χαρακτηριστικός.

Λόγω της υπερπαραγωγής IgM, το αίμα γίνεται υπερκώδες, έτσι ώστε τα συμπτώματα που αναφέρονται μπορούν να συσχετιστούν με αυτά του συνδρόμου υπερκείμενου. Στις περισσότερες περιπτώσεις, αυτή η τάση για αιμορραγία εκδηλώνεται σε συχνές ρινορραγίες, πονοκεφάλους, γενική αδιαθεσία ή θολή όραση και ακουστικά παράπονα. Προκειμένου να ανιχνευθούν κακοήθεις ασθένειες αυτού του τύπου, η ανοσοηλεκτροφαίρεση έχει γίνει από καιρό μια τυπική διαγνωστική διαδικασία.