Απο Δοκιμή ELISA είναι ιατρική εργαστηριακή εξέταση που έχει ως αποτέλεσμα την αποκαλούμενη αντίδραση αντιγόνου-αντισώματος. Μπορούν να δοκιμαστούν διαφορετικά αντιγόνα που παίζουν ρόλο στην ιατρική ή στην κτηνιατρική. Στη Γερμανία, μόνο τα διαπιστευμένα εργαστηριακά ινστιτούτα ανατίθενται να πραγματοποιήσουν τη δοκιμή.
Τι είναι η διαδικασία;
Η δοκιμή ELISA είναι μία από τις λεγόμενες ανοσολογικές μεθόδους σε ιατρικές εργαστηριακές δοκιμές. Η διαδικασία δοκιμής μπορεί να χρησιμοποιηθεί για την ανίχνευση μορίων πρωτεΐνης σε μια μεγάλη ποικιλία σωματικών υγρών.Η ELISA είναι η συντομογραφία για Δοκιμασία ενζύμου Immuno Sorbent. Επομένως, είναι ένα αγγλικό όνομα, αλλά έχει καθιερωθεί στη γερμανική ιατρική χρήση.
Η δοκιμή ELISA είναι μία από τις λεγόμενες ανοσολογικές μεθόδους σε ιατρικές εργαστηριακές δοκιμές. Η διαδικασία δοκιμής μπορεί να χρησιμοποιηθεί για την ανίχνευση μορίων πρωτεΐνης σε μια μεγάλη ποικιλία σωματικών υγρών. Η ανίχνευση αυτών των μορίων με τη σειρά της επιτρέπει την εξαγωγή συμπερασμάτων σχετικά με ορισμένες ασθένειες ή κλινικές εικόνες, γι 'αυτό οι γιατροί εξαρτούν επίσης τη διάγνωσή τους από το αποτέλεσμα μιας τέτοιας εξέτασης ELISA. Η διαδικασία εξέτασης είναι επομένως πολύ σημαντική στην καθημερινή κλινική πρακτική, σε εξωτερικούς ασθενείς ή σε εσωτερικούς ασθενείς.
Τα αντίστοιχα σωματικά υγρά, για παράδειγμα πλήρες αίμα ή υγρά από αρθρώσεις, αποστέλλονται απευθείας στο εργαστήριο αφού ληφθούν από τον ασθενή. Τα δείγματα είναι συνήθως πολύ επείγον, επειδή το φυσικό υλικό θεωρείται ευαίσθητο και πρέπει να εξεταστεί το συντομότερο δυνατό. Τα λεγόμενα επικαλυπτόμενα δείγματα μπορούν να οδηγήσουν σε ψευδώς αρνητικά αποτελέσματα επειδή οι παθολογικές πρωτεΐνες που πρέπει να ανιχνευθούν έχουν εν τω μεταξύ μειωθεί ή διαλυθεί εντελώς. Η λεγόμενη προκαταρκτική ανάλυση παίζει σημαντικό ρόλο στην ELISA · ύποπτα ή αρνητικά αποτελέσματα θα πρέπει να επαναλαμβάνονται εάν υπάρχουν κλινικά συμπτώματα.
Λειτουργία, αποτέλεσμα και στόχοι
Οι δοκιμαστικοί σωλήνες και οι λεγόμενες πλάκες μικροτιτλοδότησης είναι απαραίτητες για τη σωστή δοκιμή σε διαπιστευμένο ιατρικό εργαστήριο. Αυτές οι πλάκες με λεπτές, ημι-κοίλες εγκοπές είναι κατασκευασμένες από ειδικό πλαστικό και κάθε μία επικαλύπτεται με ένα πολύ ειδικό αντίσωμα.
Εάν το αντιγόνο που θα ανιχνευθεί υπάρχει σε ένα σωματικό υγρό που πρόκειται να εξεταστεί, λαμβάνει χώρα μια συγκεκριμένη αντίδραση αντιγόνου-αντισώματος σύμφωνα με τη λεγόμενη αρχή κλειδώματος και κλειδιού. Το προσωπικό του εργαστηρίου μπορεί να εισάγει το υλικό δείγματος στις πλάκες είτε χειροκίνητα χρησιμοποιώντας πιπέτες είτε πλήρως αυτόματα. Στα σύγχρονα ιατρικά εργαστηριακά ινστιτούτα χρησιμοποιούνται μόνο πλήρως αυτοματοποιημένα συστήματα για τη διεξαγωγή διαγνωστικών ELISA.
Ωστόσο, αυτά πρέπει να παρακολουθούνται από εκπαιδευμένο προσωπικό, ιατρικούς-τεχνικούς βοηθούς εργαστηρίου. Ο λεγόμενος εσωτερικός και εξωτερικός ποιοτικός έλεγχος αποτελεί επίσης ευθύνη του προσωπικού του εργαστηρίου, υπεύθυνος για το ιατρικό προσωπικό για εργαστηριακή ιατρική, επιδημιολογία λοίμωξης και μικροβιολογία. Μετά την πρώτη απόπειρα, δηλ. Μετά το σιφώνιο του υλικού πάνω στις πλάκες, τα ειδικά αντιγόνα στο δείγμα, εάν υπάρχουν, έχουν ήδη δεσμευτεί στα αντισώματα στην πλαστική πλάκα.
Αυτό ακολουθείται από έναν κύκλο πλύσης με φυσιολογικό αλατούχο διάλυμα για την απομάκρυνση των διαταραχών όπως ανεπιθύμητα αντιγόνα ή πρωτεΐνες από την παρτίδα. Αυτό το βήμα είναι πολύ σημαντικό για την αποφυγή ψευδών θετικών αντιδράσεων. Ένα υποτιθέμενο θετικό αποτέλεσμα που παρερμηνεύεται από το εργαστήριο μπορεί υπό ορισμένες συνθήκες να έχει θανατηφόρες συνέπειες για έναν ασθενή. Στο δεύτερο στάδιο της έρευνας, προστίθεται ένα επιπλέον αντίσωμα, το οποίο συνδέεται με ένα ένζυμο. Αυτό το σημασμένο αντίσωμα συνδέεται επίσης με το αντιγόνο.
Σε ένα τρίτο και τελευταίο βήμα, προστίθεται μια ειδική βαφή σε καθορισμένη ποσότητα, η οποία κατανέμεται σε μεγαλύτερο ή μικρότερο βαθμό από τα εναπομείναντα υπολείμματα ενζύμων. Μόνο αυτό το ένζυμο μπορεί να διασπάται το οποίο δεν είχε προηγουμένως συνδεθεί με το αντιγόνο μαζί με το αντίσωμα. Το ελεύθερο ένζυμο μπορεί να διασπάσει την προστιθέμενη βαφή. Η ακριβής ποσότητα της διαχωρισμένης βαφής μπορεί να προσδιοριστεί με μια περαιτέρω ιατρική εργαστηριακή μέθοδο, τη λεγόμενη φωτομετρία. Αυτό επιτρέπει να εξαχθεί ένα ακριβές συμπέρασμα σχετικά με το εάν και πόσο αντιγόνο υπάρχει σε ένα δείγμα υλικού.
Το τεστ ELISA δεν χρησιμοποιείται μόνο για την αρχική διάγνωση ή για την επιβεβαίωση ύποπτων διαγνώσεων σε ορισμένες ασθένειες και κλινικές εικόνες, αλλά και για την παρακολούθηση της προόδου τους. Εάν η συγκέντρωση αντιγόνου στη δοκιμή μειωθεί κατά τη διάρκεια της θεραπείας, η θεραπεία θεωρείται επιτυχής.
Μπορείτε να βρείτε το φάρμακό σας εδώ
➔ Φάρμακα για την ενίσχυση της άμυνας και του ανοσοποιητικού συστήματοςΚίνδυνοι, παρενέργειες & κίνδυνοι
Η δοκιμή ELISA είναι ιδιαίτερα ενημερωτική μέσω της ανίχνευσης αντιγονικών δομών στα σωματικά υγρά. Η δοκιμή επιτρέπει τη λεγόμενη ποιοτική, αλλά και ημιποσοτική και ποσοτική δήλωση σχετικά με την υποτιθέμενη παρουσία ορισμένων αντιγόνων στα σωματικά υγρά.
Ολόκληρο το αίμα δεν μπορεί να χρησιμοποιηθεί για την εξέταση, μόνο ορός αίματος. Μια άμεση εξέταση στον ασθενή, για παράδειγμα από το τριχοειδές αίμα της άκρης του δακτύλου, δεν είναι δυνατόν μέχρι σήμερα, όπως με κάποιες άλλες ορολογικές εξετάσεις. Στην ιατρική για τον άνθρωπο, το τεστ ELISA χρησιμοποιείται κυρίως για την ανίχνευση αντιγόνων σε βακτηριακές, ιογενείς ή μυκητιασικές λοιμώξεις. Επιπλέον, όλα τα θετικά αποτελέσματα της ορολογίας της ηπατίτιδας ελέγχονται ξανά με δοκιμή ELISA ως στάνταρ.
Ορισμένες ορμόνες, όπως η ορμόνη εγκυμοσύνης HCG, μπορούν επίσης να προσδιοριστούν με το τεστ ELISA. Εάν εμφανιστούν ορισμένες επιπλοκές κατά τη διάρκεια της εγκυμοσύνης, η ακριβής γνώση της συγκέντρωσης της ορμόνης της εγκυμοσύνης στο αίμα είναι πολύ χρήσιμη διαγνωστικά και θεραπευτικά. Ένας άλλος τομέας ένδειξης για τη δοκιμή είναι η ανίχνευση των λεγόμενων παραπρωτεϊνών στα ούρα, όπως συμβαίνουν, για παράδειγμα, σε διάφορες ασθένειες όγκων όπως το πολλαπλό μυέλωμα.
Η δοκιμή ELISA διεξάγεται ακόμη σε πολλά εργαστηριακά ινστιτούτα μέχρι σήμερα, αλλά θεωρείται παρωχημένη από ειδικούς. Η συνδεδεμένη με ένζυμο ανοσολογική αντίδραση στη δοκιμή ELISA έχει αντικατασταθεί όλο και περισσότερο τα τελευταία χρόνια από ραδιενεργά επισημασμένα αντισώματα που παρέχουν ακόμη καλύτερα ποσοτικά αποτελέσματα. Αυτές οι δοκιμές είναι επίσης γνωστές ως RIA, Radio Immunoabsorbent Assay. Περαιτέρω συγκεκριμένες περαιτέρω εξελίξεις του ELISA είναι ελαφριές χημικές μέθοδοι όπως φωταύγεια ή φθορισμός.